Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
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Abstrakt

Optimierung der HPLC-PDA-Methode auf Basis faktoriellen Designs zur Quantifizierung von Hesperidin in Orangenschalen

Priyal Desai, Niyatee Thakor, Sonal Desai*

Hintergrund: Die HPLC-PDA-Methode wurde unter Verwendung eines faktoriellen Designansatzes entwickelt und für die Schätzung von Hesperidin in Orangenschalenpulver validiert. Ein 32-faktorielles Design wurde angewendet, um die Wirkung der beiden Faktoren, nämlich Zusammensetzung der mobilen Phase und Durchflussrate, auf die verschiedenen chromatographischen Reaktionen wie Retentionszeit, Fläche und Tailing-Faktor zu bewerten. Die chromatographische Trennung wurde unter Verwendung einer Sunniest ECO-Säule (250 mm × 4,6 mm, 5 μm) als stationäre Phase erreicht, und die optimierte mobile Phase bestand aus Methanol: Wasser im Verhältnis 51,5:48,5 v/v bei einer Durchflussrate von 1,1 ml/min. Die Detektionswellenlänge betrug 285 nm. Die Retentionszeit von Hesperidin betrug 4,01 min.

Ergebnisse: Validierungsstudien haben ergeben, dass die Kalibrierungskurve über einen Bereich von 0,2–6 μg/ml mit einem Regressionskoeffizienten von 0,996 linear ist. Die LOD und LOQ lagen bei 0,066 μg/ml bzw. 0,2 μg/ml. Die prozentuale Rückgewinnung von Hesperidin lag zwischen 96 % und 105 %. Die Methode erwies sich als präzise und robust, da die Werte der prozentualen RSD sowohl in der Intraday- als auch in der Interday-Präzisionsstudie und in der Robustheitsstudie für Hesperidin unter 2,0 % lagen. Die validierte Methode wurde erfolgreich zur quantitativen Bestimmung von Hesperidin in getrocknetem Orangenschalenpulver eingesetzt.

Schlussfolgerung: Die faktorielle HPLC-PDA-Methode wurde zur Quantifizierung von Hesperidin in Orangenschalen entwickelt und validiert. Diese Methode kann vom Kräuterhersteller zur routinemäßigen Qualitätskontrolle von Orangenschalenpulver mit Hesperidin als Markerverbindung verwendet werden.