Anatomie und Physiologie: Aktuelle Forschung
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Abstrakt

Ein neues Anti-Tumor-Protein aus Calloselasma Rhodostoma-Gift in Vietnam

Kiem X Trinh, Pham Van Thuc, Chu Thi My, Long X Trinh, Thuc Thi Minh Vu, Bao Khanh Nguyen, Francis Markland J, Stephen Sweenson und Radu Minea

Ziel: Vietnam ist ein tropisches Agrarland. Jährlich kommt es zu 30.000 Schlangenbissen. Zwei giftige Schlangenfamilien verursachen große medizinische Probleme. Die gefährlichste Schlange ist dabei die Calloselasma Rhodostoma (CR). Aus diesem Grund besteht seit 2001 eine wissenschaftliche Forschungskooperation zwischen Vietnam (VN) und der University of Southern California (USC). Seit 2014 ist dieses Projekt von der Regierung von Vietnam genehmigt. Die Ziele des ersten Projekts sind die Entwicklung eines technologischen Prozesses zur Reinigung von Dsintegrin aus dem CR-Gift von VN (CRd.VN), die Bestimmung des Molekulargewichts, der Struktur und seiner biologischen Antitumorwirkung.

Methoden: Der Prozess der Sammlung und Gefriertrocknung des CR-Gifts aus VN. Die Proteinkonzentration des CR-Gifts wurde durch BCA-Test bestimmt. Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC), SDS-PAGE, Massenspektrometrie (MS)-Analyse und Sequenzierung durch tryptische Verdauung wurden zur Reinigung von CRd.VN und dessen Molekulargewicht (MW) und Struktur verwendet. Standardmethoden der Zellbiologie wurden eingesetzt, um die Fähigkeiten von CRd (in vitro) zu charakterisieren, die Thrombozytenaggregation, Adhäsion, Migration und Invasion von Tumorzellen zu hemmen. Seine Antikrebsaktivität wurde in einem murinen Brustkrebsmodell (BC) (in vivo) getestet.

Ergebnisse: Peak 7 der HPLC (CRd.VN) zeigte ein einzelnes ~10 kDa-Band auf dem SDS-PAGE-Gel. Das Molekulargewicht, die Struktur und die Sequenz von CRd.VN betragen 7,33 kDa, ein Monomer mit 68 Aminosäuren mit einem RGD-Motiv (Position 49-51) und 6 Disulfidbindungen. Die Antikrebsaktivität von CRd.VN ist sehr stark.

Schlussfolgerung: Wir haben gezeigt, dass CRd.VN ein mögliches Antitumormittel mit klinischem Potenzial ist. Es bedarf jedoch weiterer Forschung zur rekombinanten Produktion von CRd, zu vorläufigen pharmakokinetischen/toxikologischen Eigenschaften und Antitumoraktivitäten.