Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
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Abstrakt

Eine empfindliche und störungsfreie Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie-Methode zur Messung von Metanephrinen im Plasma

Jessica Gabler, Chao Yuan, Witold Woroniecki, Huafen Liu und Sihe Wang

Hintergrund: Plasmametanephrine sind die wichtigsten Biomarker zur Diagnose von Phäochromozytomen. Die niedrigen physiologischen Metanephrinwerte, physikochemischen Eigenschaften und potenziellen Interferenzen machen es jedoch schwierig, eine hohe Sensitivität und Spezifität zu erreichen. In diesem Bericht haben wir eine empfindliche und störungsfreie Flüssigchromatographie-Tandem-Massenspektrometrie-Methode (LC-MS/MS) zur Messung von Plasmametanephrinen mit einfacher Probenvorbereitung entwickelt und validiert.

Methoden : Plasmaproben wurden mithilfe von Festphasenextraktionskartuschen mit schwachem Kationenaustausch extrahiert und per LC-MS/MS mit einer Analysezykluszeit von weniger als sechs Minuten analysiert.

Ergebnisse: Es wurden absolute Ionenunterdrückung und Matrixeffekte beobachtet, die jedoch durch die internen Standards vollständig kompensiert wurden. Epinephrin, ein isobarer Störstoff von Normetanephrin, wurde chromatographisch getrennt, und es wurden keine Störungen durch andere häufige Störstoffe beobachtet. Die Methode war von 0,08 bis 22,2 nmol/l für Normetanephrin und von 0,03 bis 8,2 nmol/l für Metanephrin linear, mit einer Genauigkeit von 81 bis 107 %. Bis 56,8 nmol/l für Normetanephrin und 8,7 nmol/l für Metanephrin wurde kein Übertrag beobachtet. Intraassay- und Gesamt-Variablen lagen für Normetanephrin bei 6,8 % und für Metanephrin bei 5,2 % für drei getestete Konzentrationen. Basierend auf der Deming-Regression zeigte der Vergleich mit einer Referenz-LC-MS/MS-Methode unter Verwendung von Patientenproben (n = 40) eine
Steigung von 0,973, einen Achsenabschnitt von 0,11 nmol/l und einen Korrelationskoeffizienten von 0,9936 für Normetanephrin und eine Steigung von 1,039, einen Achsenabschnitt von -0,014 nmol/l und einen Korrelationskoeffizienten von 0,9914 für Metanephrin. Der mittlere Unterschied betrug 3,5 % bzw. -1,6 % für Normetanephrin und Metanephrin.

Schlussfolgerung: Dieser LC-MS/MS-Test ist empfindlich und frei von Interferenzen für die Quantifizierung von Plasmametanephrinen