Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
Offener Zugang

Abstrakt

Eine einfache und empfindliche Methode zur quantitativen Messung von Methylmalonsäure mittels turbulenter Durchflusschromatographie und Tandem-Massenspektrometrie

Awet GT, Ryan CS, Lakshmi VR und Dean C Carlow

Es wurde eine einfache und empfindliche Methode zum Nachweis von Methylmalonsäure in Serum ohne Derivatisierung entwickelt. Diese Methode umfasst eine Proteinfällung mit Methanol, gefolgt von einer zusätzlichen Probenreinigung durch turbulente Flüssigkeitschromatographie ( TFLC). Die Probe wurde direkt in das turbulente Flüssigkeitschromatographie-Tandem- Massenspektrometriesystem (TFLC-MS/MS) zur Online-Extraktion injiziert, gefolgt von einer HPLC-Trennung. Das Eluent wurde in das Massenspektrometer überführt und durch erhitzte negative Elektrospray-Ionisation (HESI) ionisiert, und der Analyt wurde mithilfe einer Sechs-Punkte-Kalibrierungskurve quantifiziert. Der validierte analytische Messbereich (AMR) beträgt 30–1.000 nMol/l. 10- und 200-fache Verdünnungen wurden validiert und ergaben einen klinisch berichtbaren Bereich (CRR) von 30–200.000 nMol/l. Die Ungenauigkeitswerte zwischen und innerhalb eines Tages bei Konzentrationen, die den AMR überspannten, lagen bei weniger als 15 %. Diese Methode wurde mit einer etablierten LC-MS/MS-Methode in einem CLIA-zertifizierten nationalen Referenzlabor verglichen und zeigt eine ausgezeichnete Korrelation mit unserer TFLC-MS/

MS

Verfahren.