Zeitschrift für klinische und zelluläre Immunologie
Offener Zugang

Abstrakt

Ein In-vitro- Modell zur Untersuchung der HIV-Infektion von Thymozyten

Charlene D. Young und Jonathan B Angel

Die Untersuchung menschlicher Thymozyten erfordert eine geeignete Matrix, um die ordnungsgemäße Funktion der Thymozyten zu ermöglichen. Obwohl OP9-DL1-Zellen als ideales Co-Kultursystem für die Erzeugung von T-Zellen aus ihren Vorläuferzellen gut etabliert sind, muss ihre Fähigkeit, eine gemischte Population reifer menschlicher Thymozyten für HIV-Infektionsstudien in vitro zu unterstützen , erst noch nachgewiesen werden. Wir untersuchten die Auswirkungen der Co-Kultivierung einer heterogenen Population reifer menschlicher Thymozyten mit einer aus Mäusen stammenden Zelllinie (OP9), die mit dem Notch-Liganden Delta-like 1 (OP9-DL-1) transduziert wurde, und verglichen dies mit der Standard-Co-Kultur mit menschlichen Thymusepithelzellen (TEC). Die Co-Kultivierung von Thymozyten mit OP9-DL1-Zellen führte im Vergleich zu TEC-Co-Kulturen zu einer höheren Lebensfähigkeit und geringeren Apoptose. Die Subset-Verteilung und die CD127-Expression von Thymozyten variierten leicht zwischen den Bedingungen. Mit OP9-DL1-Zellen kokultivierte Thymozyten wiesen im Vergleich zu TEC-Kokulturen einen geringeren Anteil an CD3 ^{+ DP-Zellen und einen höheren Anteil an SP4-Zellen auf. Die reifen CD3 +} CD4 ⁺ CD8- (SP4 ⁾ -Zellen wiesen in OP9-DL1-Kulturen im Vergleich zu TEC auch geringere CD127-Expressionswerte auf. Die Stimulation der Thymozyten mit Interleukin-7 führte zu einer Verringerung der CD127-Expression in OP9-DL1-Kokulturen, wie dies zuvor bei TEC-Kokulturen beobachtet wurde. Mit OP9-DL1 kokultivierte Thymozyten neigten zu höheren IL-7-induzierten STAT-5-Phosphorylierungswerten und wiesen höhere Interleukin-7-induzierte Bcl-2-Expressionswerte auf. OP9-DL1-Zellen bieten eine Mikroumgebung, die eine HIV-Infektion von Thymozyten in vitro ermöglicht . Die Co-Kultivierung von Thymozyten mit OP9-DL1 wird die Untersuchung menschlicher Thymozyten erleichtern und bei der Untersuchung exogener Reize oder Infektionen einzelner Thymozyten-Subtypen hilfreich sein.