Zeitschrift für antivirale und antiretrovirale Medikamente
Offener Zugang

Abstrakt

Antivirale Aktivität von Sirna UL42 gegen Herpes Simplex Virus Typ 1 in HeLa Zellkultur

Hamid Reza Mollaei, Seyed Hamidreza Monavari, Seyedalimohammad Arabzadeh, Mahmood Shams Shahrabadi und Mehdi Fazlalipour

RNA-Interferenz (RNAi) ist ein Prozess, bei dem eingeführte kleine interferierende RNA (siRNA) den spezifischen
Abbau von mRNA mit identischen Sequenzen verursachen kann. In dieser Studie haben wir siRNAs verwendet, die auf das UL42-Gen des
humanen Herpes-simplex-Virus Typ 1 (HSV-1) abzielen, das ein multifunktionales Polypeptid kodiert, das für die DNA-
Replikation des Virus wichtig ist, an DNA bindet, stabil mit der Virus-DNA-Polymerase (Pol) assoziiert und die Länge
der von Pol synthetisierten DNA-Ketten verlängert. Für die HSV-1-Infektion wurde die HeLa-Zelllinie verwendet und eine SiRNA-Transfektion wurde durchgeführt,
um das UL-42-Gen in der Zellkultur zu unterdrücken. Der Rückgang des HSV-1-Titers wurde mittels Echtzeit-PCR beobachtet, um
den Rückgang der DNA-Synthese und -Translation von HSV-1 festzustellen. Die Hemmraten von siRNA1 und siRNA2 bei der Plaquebildung bei HSV-1
wurden angegeben. Im Vergleich mit der Viruskontrolle verringerten siRNA1 und siRNA2 die DNA-Replikation von HSV-1. Die
Entscheidung, ob der Rückgang der Anzahl der HSV-1-Plaques auf die siRNA-Stilllegung der Expression des UL42-
Gens zurückzuführen ist, wurde durch eine Echtzeit-PCR getroffen, die darauf hindeutet, dass UL42-spezifische siRNAs die Expression des UL42-Gens signifikant blockierten.
Im Vergleich zur Viruskontrolle reduzierten siRNA1 und siRNA2 die Expression des UL42-Gens. In dieser Studie
schaltete die synthetische siRNA die UL42-mRNA-Expression effektiv und spezifisch aus und hemmte die HSV-1-Replikation. Darüber hinaus
bieten unsere Daten neue Möglichkeiten für RNAi als genetisches Werkzeug zur Hemmung der HSV-1-Replikation.