Zeitschrift für Zellwissenschaft und Therapie
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Abstrakt

Anwendung von Hypoxie zur Etablierung epithelial-mesenchymaler Übergangsmodelle in Nierenzellkarzinom-Zelllinien

Baoan Hong, Changhua Zhou, Xin Du, Siqi Chen, Xiaohu Deng, Shayiremu Duoerkun, Qing Li, Yong Yang, Kan Gong und Ning Zhang

Zweck: Erstellung von Modellen des epithelialen-mesenchymalen Übergangs (EMT) in Nierenzellkarzinom-Zelllinien durch CoCl2-induzierte Hypoxie.
Materialien und Methoden: Im Experiment wurden die Nierenzellkarzinom-Zelllinien A498 und 786-O verwendet und CoCl2 wurde zur Simulation von Hypoxie verwendet. Die Krebszellen wurden mit unterschiedlichen CoCl2-Konzentrationen kultiviert. Veränderungen in Morphologie und Zytoaktivität wurden ermittelt, um die optimale CoCl2-Konzentration zur Simulation von Hypoxie zu erhalten. Nach der CoCl2-Behandlung wurden die Zellen einer Western-Blot-Analyse unterzogen, um die Expression von HIF-1α und die Veränderungen von EMT-verwandten Molekülen (E-Cadherin, Fibronektin) zu testen.
Ergebnisse: Die Zellverbindungen der mit CoCl2 behandelten Gruppen waren im Vergleich zur Kontrollgruppe locker und verstreut. Die Wirkung von CoCl2 auf die Lebensfähigkeit von A498-Zellen war bei geringer Dosierung nicht ausgeprägt, aber als die CoCl2-Konzentration 250 mM erreichte, nahm die Zellaktivität allmählich ab. Im Gegensatz dazu induzierte CoCl2 die Proliferation von 786-O-Zellen im Bereich von 50 mM bis 200 mM, hemmte jedoch das Zellwachstum bei Dosierungen über 200 mM. Die Expression von E-Cadherin wurde in den Zelllinien A498 und 786-O unter CoCl2-simulierter Hypoxie im Vergleich zu normoxischen Bedingungen signifikant herunterreguliert und Fibronektin hochreguliert (P<0,01).
Schlussfolgerungen: EMT-Modelle der Nierenzellkarzinom-Zelllinien wurden erfolgreich durch CoCl2-induzierte Hypoxie etabliert. Die Modelle werden uns helfen, die Mechanismen von EMT weiter zu untersuchen und neue therapeutische Ziele zur Hemmung von Tumorinvasion und Metastasierung zu untersuchen.