Zeitschrift für Leukämie
Offener Zugang

Abstrakt

Beta-Hydroxyisovalerylshikonin hemmt das Wachstum von U266-Multiple-Myelomzellen durch Aktivierung des mitochondrialen Signalwegs

Yihui He, Xiaoyan Chen und Lingying Kong

Hintergrund: Beta-Hydroxyisovalerylshikonin (Beta-HIVS) ist eine Verbindung, die aus dem traditionellen orientalischen Heilkraut Lithospermum radix isoliert wird. Dieses Medikament wirkt als ATP-nichtkompetitiver Inhibitor von Protein-Tyrosinkinasen (PTKs) und zeigt großes Potenzial zur Induktion der Apoptose gegen menschliche Krebszellen. Wir untersuchten die Wirkung von Beta-HIVS auf multiple Myelomzellen U266 und klärten Details des primären Mechanismus seiner Apoptose-induzierenden Aktivität. Ziel: Ziel dieser Arbeit war es, die Apoptose-induzierende Aktivität von Beta-HIVS auf U266-Zellen sowie die zugrundeliegenden Mechanismen nachzuvollziehen. Methoden: Zur Abschätzung der Wirkung von Beta-HIVS auf die Lebensfähigkeit und Koloniebildung von U266-Zellen wurden ein Cell Counting Kit-8 (CCK-8)-Test und ein Koloniebildungstest durchgeführt. Die Apoptoseanalyse wurde anhand von DAPI-Fluoreszenzfärbung und DNA-Fragmentierungstests durchgeführt. Echtzeit-PCR wurde eingesetzt, um Veränderungen der Bcl-2- und Bax-mRNA-Expression zu bewerten, während indirekte Immunfluoreszenztests und Western Blotting zur Validierung der Expression von Bcl-2, Bax, Caspase-3, Caspase-9, PARP und Cytochrom c genutzt wurden. Ergebnisse: Der CCK-8-Test und der Koloniebildungstest zeigten, dass die Beta-HIVS-Behandlung zu signifikant verringerter Zellproliferation (P < 0,05 oder 0,01) und Koloniebildung (P < 0,01) führte. Echtzeit-PCR-Ergebnisse zeigten, dass der Expressionsgrad von Bcl-2-mRNA 72 Stunden nach der Beta-HIVS-Ko-Kultivierung verringert war (P < 0,01), obwohl sich die Bax-mRNA ohne signifikante Veränderung veränderte. Der Immunfluoreszenztest zeigte, dass Caspase-3 in der mit Beta-HIVS behandelten Gruppe aktiviert war, begleitet von einer erhöhten Expression von Cytochrom c. Western Blotting zeigte auch, dass die Expression des Bcl-2-Proteins in der mit Beta-HIVS behandelten Gruppe abnahm und Cytochrom c 72 Stunden nach der Kokultivierung zunahm. Darüber hinaus wurden Caspase-3 und -9 sowie PARP aktiviert, alle mit P<0,01 im Vergleich zu den beiden Kontrollgruppen. Schlussfolgerung: Beta-HIVS zeigte eine bemerkenswerte Apoptose-induzierende Aktivität in U266-Zellen, möglicherweise durch Hemmung der Proliferation und Förderung der Apoptose über den mitochondrialen Weg.