ISSN: 2471-9315
Elham Omer Mahgoub1*, Galal M. Abdella
Das VP1-Kapsidgen ist für die Expression eines Proteins unerlässlich, das die Diagnose einer Infektion mit dem Hühneranämievirus (CAV) in Hühnerbeständen ermöglicht. In dieser Studie exprimierte der prokaryotische Expressionsvektor pRSET–B das VP1-Gen in E. coli Top10. Das VP1-Protein wurde in E. coli TOP10 als lösliches Fusionsprotein exprimiert. Die Löslichkeit des VP1-Proteins aktiviert das immunogene Epitop, sodass es mit einem 50 kDa starken anti-VP1-monoklonalen Antikörper leicht erkannt werden kann. Der Batch-Fermentationsprozess wurde verwendet, um die Produktion des VP1-Proteins in E. coli zu steigern. Infolgedessen erhöhte das rekombinante VP1-Protein erfolgreich die Ausbeute des exprimierten VP1-Proteins während einer Kultur mit hoher Bakterienzelldichte. Dialyse und Entsalzung erhöhten die spezifische Aktivität und die endgültige Ausbeute der VP1-Proteinfraktion, wenn der Schritt der Tangentialflussfiltration (TFF) verwendet wurde. Die statistische Berechnung indirekter und kommerzieller ELISA-Tests ergab, dass indirekte ELISA mit kommerziellen Tests mithalten können, da sie weniger Lösungsmenge, geringere Kosten und höhere Spezifität erfordern. Das in der Batch-Fermentationsbakterienkultur exprimierte VP1-Protein wurde als Antigen getestet, um Antikörper gegen CAV in infizierten Hühnern mithilfe des entwickelten indirekten Enzyme-Linked Immunosorbent Assay (ELISA) nachzuweisen.