ISSN: 2157-7013
Ekaterina Semenova, Eugeniusz K Machaj and Tomasz Oldak
Mesenchymale Stammzellen (MSC) sind dank ihrer Fähigkeiten eine gute Quelle für die Zelltherapie. MSCs üben sehr wichtige immunmodulatorische Wirkungen aus: Sie unterdrücken die T- und B-Zellproliferation und die Funktion natürlicher Killerzellen und begrenzen auch die Expression des Haupthistokompatibilitätskomplexes II. Plazenta und Nabelschnur sind die bequemsten Quellen für MSCs, die keine ethischen Probleme mit sich bringen. Darüber hinaus ist die Plazenta-Entbindung und Isolierung der Nabelschnur nicht mit einer schwierigen oder invasiven Methode verbunden. MSCs aus Whartons Sulze und Plazenta (Amnion, Chorion, Zotten, Decidua basalis) wurden mit dem folgenden Protokoll isoliert: mechanisch und enzymatisch (Kollagenaseverdauung). Das Proliferationspotenzial wurde mit einer PDT-Analyse bewertet. Zur Multidifferenzierung von MSCs wurden die Zellen 2-3 Wochen lang bei 37 °C in einer Atmosphäre mit 5 % CO2 und 90 % Luftfeuchtigkeit in verschiedenen Differenzierungsmedien inkubiert.
Wir konnten erfolgreich MSCs aus Plazenta und Nabelschnur isolieren. Die mechanische Isolierung war für alle Gewebearten möglich. Bei der enzymatischen Verdauung der Nabelschnur konnten wir nur eine begrenzte Anzahl an MSCs gewinnen, die für weitere Analysen nicht ausreichte.
Alle isolierten MSCs hatten eine typische fibroblastische Morphologie, exprimierten Zelloberflächenmarker (CD73, CD90, CD105), exprimierten keine hämatopoetischen und endothelialen Marker und differenzierten sich in Osteozyten, Chondrozyten und Adipozyten, was eine Reihe von Möglichkeiten ist, die von der International Society of Cell Therapy empfohlen werden. Wir haben keine signifikanten Unterschiede in der Morphologie oder Differenzierung zwischen Zellen aufgrund des Ursprungsgewebes und der Isolierungsmethode festgestellt. Beides: Kollagenaseverdauung und mechanisches Schneiden führten zu einer großen Menge geernteter Zellen, aber die Verwendung von Enzymen beschleunigt diesen Prozess.