Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
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Abstrakt

Bestimmung von Allopurinol und Oxypurinol im Plasma von Hunden mittels Hochleistungsflüssigkeitschromatographie mit einem Ultraviolettdetektor: Anwendung für pharmakokinetische Studien

Godoy ALPC, De Jesus C, De Oliveira ML, Rocha A, Pereira MPM, Larangeira DF, Lanchote VL, Barrouin-Melo SM

Die Hochleistungsflüssigchromatographie mit Ultraviolettdetektion (HPLC-UV) wurde zur Quantifizierung von Allopurinol und seinem aktiven Metaboliten Oxypurinol in Hundeplasma mit natürlich erworbener zoonotischer viszeraler Leishmaniose entwickelt und validiert. Allopurinol ist ein starker Inhibitor des Enzyms Xanthinoxidase; ein Enzym, das die Umwandlung von Hypoxanthin in Xanthin und von Xanthin in Harnsäure katalysiert. In der Veterinärmedizin ist Allopurinol zur Behandlung der viszeralen Leishmaniose bei Hunden angezeigt. Allopurinol wird verwendet, um die Synthese von Leishmania-RNA zu hemmen. Die für die Entwicklung der chromatographischen Analyse von Hundeplasmaproben unter Verwendung der mobilen Phase der HPLC-UV definierten Bedingungen bestehen aus einer Mischung aus 0,1 % Wasser, 88 % Ameisensäure und 0,25 % Acetonitril. Allopurinol und Oxypurinol wurden auf einer LiChroCART ^® 125-4 LiChrospher ^® 100 RP-8 (5 μm)-Säule mit einer Flussrate von 0,7 mL min ^-1 getrennt und der Detektorbetrieb erfolgte bei einer Wellenlänge von 254 nm. Acyclovir wurde als innerer Standard verwendet. Die Validierung der HPLC-UV-Methode wurde anhand der Nachweis- und Quantifizierungsgrenzen, Linearität, Reproduzierbarkeit und Wiederholbarkeit bestimmt. Die Methode hatte eine untere Quantifizierungsgrenze von 0,1 μg.mL ^{-1 für sowohl Allopurinol als auch Oxypurinol. Die Analyse war bei Konzentrationen von 0,1-20,0 μg.mL -1} für sowohl Allopurinol als auch sein Oxypurinol linear . Der Präzisionswert intra- und interstromig für alle angegebenen Konzentrationen hatte eine Koeffizientenvariation von weniger als 15 %. Die Vertrauensgrenzen von HPLC-UV für die Analyse von Allopurinol und Oxypurinol im Hundeplasma weisen darauf hin, dass die Methode für die pharmakokinetische Studie mit Mehrfachdosen von Allopurinol bei Hunden anwendbar ist. Sie ist effizient, genau und empfindlich. Diese Studie zur pharmakokinetischen Forschung von Allopurinol und Oxypurinol bei Hunden mit viszeraler Leishmaniose im Stadium I und II führte zu ähnlichen Forschungsergebnissen, die mit der Untersuchung an gesunden Hunden korrelierten.