Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
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Abstrakt

Entwicklung und Validierung einer schnellen Hochleistungsflüssigchromatographiemethode mit UV-Detektion zur Bestimmung von Vancomycin in Mausplasma

Krishna Muppidi, Andrew S. Pumerantz, Guru Betageri und Jeffrey Wang

Eine schnelle Hochleistungsflüssigchromatographie (HPLC)-Methode zur Quantifizierung von Vancomycin in Plasmaproben von Mäusen wurde entwickelt und validiert. Norvancomycin wurde als innerer Standard verwendet. Die chromatographische Trennung erfolgte auf einer Vydac C18-Säule (4,6 × 50 mm, 3 μm Partikelgröße) und die Detektion erfolgte bei 214 nm. Eine Gradientelution wurde mit den mobilen Phasen 0,1 % v/v Trifluoressigsäure (A) und 95:5 v/v Acetonitril: 0,1 % TFA (B) und einer Flussrate von 1 ml/min programmiert. Die Gesamtlaufzeit betrug 15 min. Die Kalibrierungskurve war über den Bereich von 0,1–20 μg/ml linear, mit einem Korrelationskoeffizienten (r) über 0,997 und einer unteren Quantifizierungsgrenze (LLOQ) von 0,1 μg/ml. Die Intra-Day-Genauigkeitswerte lagen zwischen 90 und 112 % und die Inter-Day-Genauigkeitswerte zwischen 96 und 104 %. Die Präzisionswerte lagen zwischen 1,7 und 9,5 % für Intra-Day- und 6,3 und 9,4 % für Inter-Day-Versuche. Stabilitätsstudien unter normalen Laborbedingungen ohne signifikanten Verlust des Arzneimittels. Der Test wurde erfolgreich in der Pharmakokinetik- und Bioverteilungsstudie neuer Vancomycin-Formulierungen bei Mäusen eingesetzt.