Katalin Gombos, Miklos Oldal, Kristztina Ildiko Kalacs, Kristztina Godony, Akos Varnagy, Jozsef Bodis und Gabor L Kovacs
Hintergrund: Droplet-Digital-PCR-Analyse von menschlichen Embryonalkulturmedien, die im Rahmen einer Proof-of-Concept-Studie zum Schwangerschaftsausgang durch IVF gesammelt wurden. miR-191-3p wurde in verbrauchten menschlichen Embryonalkulturmedien von morphologisch ähnlichen, qualitativ hochwertigen Embryonen analysiert, die sich nach späterem Transfer entweder zu reproduktionsfähigen Embryonen und gesunden Neugeborenen entwickelten oder von solchen, bei denen es in einem frühen Stadium der Schwangerschaft zu einer Fehlgeburt kam. Methoden: Verbrauchte Kulturmedien im Morula-Blastozysten-Stadium (3. Tag) wurden von Embryonen gesammelt, die mit ICSI befruchtet wurden und einem Embryotransfer unterzogen wurden. Nach dem registrierten Schwangerschaftsausgang wurden 40 Proben aus der Gruppe der reproduktionsfähigen Embryonen, 40 Proben von Fehlgeburten und ihre parallelen leeren Kulturmedienproben in die miRNA-Analyse aufgenommen. Die Isolierung und quantitative Erkennung von miRNA aus den embryonalen Kulturmedien erfolgte auf einer automatisierten Droplet-Digital-Polymerase-Kettenreaktionsplattform. Ergebnisse: Quantitative Analyse und ANOVA-Auswertung bestätigten, dass miR-191-3p in den Kulturmedien von reproduktiv kompetenten menschlichen Embryonen am 3. Tag in signifikant höherer Konzentration vorhanden war (mittlerer Konzentrationsunterschied = 20.478, p = 1 × 10-4) als bei der Fehlgeburt. Kontroll-Blankkulturmedien waren miR-191-3p-negativ. Schlussfolgerung: Das Vorhandensein von miR-191-3p in Kulturmedien menschlicher Blastozysten weist auf den tatsächlichen embryonalen Ursprung hin und veränderte die Expressionsmuster je nach klinischem Ergebnis nach der Übertragung. Es könnte ein Kandidat für einen molekularen Marker zur nichtinvasiven Beurteilung der reproduktiven Embryonalkompetenz vor der Implantation sein.