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Abstrakt

Bewertung der klassischen Schweinepestvirus (CSFV)-spezifischen IgA-, IgG- und IgM-Antikörperreaktion bei Schweinen, die mit Alphavirus-Replikonpartikel-exprimierten Antigenen geimpft wurden

Mohammad M Hossain* und Raymond RR Rowland

Das E2-Glykoprotein des klassischen Schweinepestvirus (CSFV) wurde in einem Expressionssystem auf Basis von Replikonpartikeln (RP) des Alphavirus exprimiert. Ein Fluoreszenz-Mikrosphären-Immunoassay (FMIA) wurde zur Erkennung von CSFV-E2-spezifischen Antikörpern bei mit Alphavirus RP geimpften Schweinen entwickelt. Das vollständige CSFV-E2 (aa 1-376) wurde in mehrere Stücke fragmentiert und rekombinante Proteine ​​wurden in Escherichia coli exprimiert. Gereinigte Proteine ​​wurden an Mikrosphärenperlen konjugiert, die Zielantigene wurden zu einem einzigen Multiplex zusammengesetzt und gegen Seren getestet, die mit Alphavirus-exprimierten Antigenen geimpft wurden. Die Ergebnisse wurden als mittlere Fluoreszenzintensität (MFI) angegeben, die aus dem Medianwert für mindestens 100 Mikrosphären gewonnen wurde, und die MFI-Werte wurden in ein positives Verhältnis pro Probe (S/P) umgerechnet. Von den acht rekombinanten E2-Proteinen, die in dieser Studie untersucht wurden, wurden die höchsten MFI-Werte für E2 (aa 1-181) erhalten. Das CSFV-E2-Glykoprotein wurde in einem auf Alphaviren basierenden Replikon-Expressionssystem exprimiert. Die Ergebnisse zeigen, dass geimpfte Tiere CSFV-spezifisches IgA, IgG und IgM in Serum und Mundflüssigkeit aufwiesen. Die MFI-Werte für die negative Serumprobe zeigten eine 20- bis 70-fache Reduktion im Vergleich zur positiven Serumprobe. Die Antikörperreaktion auf CSFV-Antigene war IgG>IgM>IgA. Die Ergebnisse zeigten, dass der gleichzeitige Nachweis von IgG-, IgM- und IgA-Antikörpern ein verbessertes Diagnoseinstrument darstellen könnte.