Innere Medizin: Offener Zugang
Offener Zugang

Abstrakt

Genetische Veränderung von Bakterien, die Uratoxidase produzieren können

Xin Cheng, Bo Yang, Dong Liu, L Juan He, Gan Chen, Yong Chen, R Fa Huang und Y Sheng Jiang

Das Uratoxidase-Gen wurde in Lactobacillus bulgaria kloniert, um Uratoxidase zur Zersetzung von Harnsäure und Behandlung von Hyperurikämie zu produzieren. Unter Verwendung der Uratoxidase-Gensequenzen von Candida utilis (Urikase, E12709) auf GenBank wurden PCR-amplifizierte Uratoxidase-Genfragmente in das Plasmid pMG36e eingefügt, um das rekombinante Plasmid PMG36e-U zu konstruieren, das dann in Lactobacillus bulgaria elektrotransformiert wurde. Wir verwendeten SDS-PAGE, um Uratoxidase in den Zelllysaten der gentechnisch veränderten Bakterien zu identifizieren und die Uratoxidase-Aktivität zu messen. Das Uratoxidase-Gen wurde aus dem Genom von Candida utilis PCR-amplifiziert. Das rekombinante Plasmid PMG36e-U, das das Uratoxidase-Gen enthält, wurde erfolgreich in Lactobacillus bulgaria elektrotransformiert. Das Molekulargewicht der von den gentechnisch veränderten Bakterien synthetisierten Uratoxidase-Untereinheit betrug basierend auf SDS-PAGE ungefähr 34 KD, und die in vitro-Enzymaktivität der Bakterienpräparation betrug bis zu 0,33 u/mL. Schlussfolgerung: Das Uratoxidase-Gen wurde in Lactobacillus bulgaria geklont und baute erfolgreich Harnsäure ab.