Zeitschrift für antivirale und antiretrovirale Medikamente
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Abstrakt

HIV-1-Varianten mit reduzierter Empfindlichkeit gegenüber sulfatiertem Oligosaccharid Muparfostat enthalten Mutationen in den Hüllglykoproteinen gp120 und gp41

Joanna Said, Elin Andersson, Edward Trybala und Tomas Bergstrom

Die Anheftung des humanen Immundefizienzvirus Typ 1 (HIV-1) an Wirtszellen wird hauptsächlich durch die Zelloberflächenmoleküle CD4 und einen der Chemokin-Corezeptoren CCR5 oder CXCR4 vermittelt und durch zelluläre Heparansulfatketten von Syndecanen erleichtert. Obwohl Heparansulfat-Mimetika in kultivierten Zellen eine starke Anti-HIV-1-Aktivität aufweisen, konnten diese Verbindungen bei klinischen Tests als Mikrobizide eine Infektion beim Menschen nicht verhindern. Wir haben zuvor gezeigt, dass das niedermolekulare und stark sulfatierte Oligosaccharid Muparfostat in Verbindung mit Cholestanol eine viruzide Aktivität aufwies, während das nicht konjugierte Muparfostat (früher bekannt als PI-88) die HIV-1-Infektion kultivierter Zellen nur reversibel hemmte. Um die unterschiedlichen Anti-HIV-1-Wirkungen von Muparfostat und des Muparfostat-Cholestanol-Konjugats zu klären, versuchten wir in dieser Arbeit, mithilfe des weniger wirksamen Muparfostat auf Virusresistenz zu selektieren. Der Laborstamm HIV-1IIIB wurde in Gegenwart der Verbindung sukzessive in H9-Zellen vermehrt. Das nach 21-24 Passagen selektierte Virus schien etwa 3-4 Mal weniger empfindlich gegenüber Muparfostat zu sein als der ursprüngliche HIV-1IIIB-Stamm oder das Kontrollvirus, das parallel in Abwesenheit von Muparfostat passagiert wurde. Eine vergleichende Analyse der Nukleotidsequenzen dieser Viren ergab die Anwesenheit der I152V-Substitution in V2, die K276R-Änderung in V3, die Deletion der fünf Aminosäurenwiederholungen 366FNSTW370 in V4 von gp120 und die L33S- und A101T-Änderungen in der transmembranären gp41-Komponente des mit Muparfostat passagierten Virus. Die Selektion viraler Varianten mit Mutationen in gp41 war eine unerwartete Beobachtung, da dieses Protein von HIV-1 selten von sulfatierten Polysacchariden angegriffen wird.