Zeitschrift für antivirale und antiretrovirale Medikamente
Offener Zugang

Abstrakt

Menschliche monoklonale Fab-Antikörper gegen das West-Nil-Virus und ihre neutralisierende Aktivität in vitro und in vivo analysiert

Tao Duan, Monique Ferguson, Lintian Yuan, Fangling Xu und Guangyu Li

Der Krankheitsverlauf bei einer Infektion mit dem West-Nil-Virus (WNV) führt bei Menschen zu Meningitis oder Enzephalitis und kann zum Tod führen, insbesondere bei älteren und immungeschwächten Personen. Passive Immunität durch Immunglobuline hat sich bei der Behandlung einiger Patienten mit WNV-Infektion als wirksam erwiesen, weshalb die Entwicklung menschlicher Anti-WNV-Antikörper von Bedeutung ist. Ziel dieser Studie war die Erstellung einer Fab-spezifischen Phagendisplay-Bibliothek gegen WNV sowie die Identifizierung und Auswahl von Klonen mit neutralisierender Aktivität. Die Gesamt-RNA wurde aus peripheren Blutlymphozyten (PBLs) von zwei immunisierten Personen extrahiert und mittels RT-PCR die Fab-Fragmente amplifiziert, die die schweren (VH) und leichten (VL) Ketten enthalten. Die amplifizierten Gene wurden sequenziell in den rekombinanten Antikörperexpressionsvektor pComb3-H kloniert und die Fab-spezifische Phagendisplay-Bibliothek wurde mit dem Helferphagen VCS-M13 verpackt. Es wurden fünf Panning-Runden mit der WNV-E-Proteindomäne III durchgeführt und dann wurden bindende Antikörper durch ELISA ausgewählt.