Andrologie- Offener Zugang
Offener Zugang

Abstrakt

Identifizierung spermatogonialer stammzellähnlicher Zelldifferenzierung in vitro bei Patienten mit Azoospermie unter Verwendung modifizierter Medien aus humanen embryonalen Stammzellen (HESC)

Azantee YAW, Lokman MI and Roszaman R

Hintergrund: Bei der Spermatogenese handelt es sich um einen Prozess der Vermehrung und Differenzierung von spermatogonischen Stammzellen (SSC) in den Hoden zu haploiden Spermien. Bei Patienten mit Azoospermie ist die Spermatogenese beeinträchtigt, da sie Schwierigkeiten haben, normale Spermien zu erhalten. Ziel dieser Studie ist die Vermehrung und Differenzierung von SSC-ähnlichen Zellen in In-vitro-Kulturen aus Proben von Azoospermiepatienten und die Bestimmung des beteiligten Genexpressionsmusters. Methoden und Ergebnisse: Hodenbiopsiegewebe von Patienten mit obstruktiver (OA) und nicht-obstruktiver Azoospermie (NOA) wurde dissoziiert und in unterschiedlichen Medien aus menschlichen embryonalen Stammzellen (HESC) kultiviert, denen je nach Kulturtag spezifische Wachstumsfaktoren und Reproduktionshormone zugesetzt wurden, wobei 24-Well-Platten verwendet wurden. Nach 5-wöchiger Kultur bildeten sich SSC-ähnliche Zellkolonien. Die Genexpressionsanalysen erfolgten am 49. und 90. Tag mittels quantitativer Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (q-RT PCR). OCT4 wurde bei NOA-Patienten nachgewiesen und ITGB1 wurde bei OA-Patienten nach 49 Tagen Kultur identifiziert. Die Genexpression für alle Stadien spermatogener Zellen am Tag 90 wurde hauptsächlich bei OA-Patienten nachgewiesen; ITGB1, SCP3, H2B und TNP1. Das Gen TNP1 wurde jedoch nur bei NOA-Patienten im Stadium der Spermatidenbildung exprimiert. Schlussfolgerungen: Unsere Ergebnisse zeigen, dass es ein Potenzial gibt, Spermienkulturen in vitro aus Hodenbiopsien von azoospermischen Patienten für die weitere klinische Anwendung zu entwickeln.