ISSN: 1745-7580
Ricardo Andrez Machado-de-Ávila, Mariana Velloso, Daysiane Oliveira, Stephanie Stransky, Ana Flor-Sá, Francisco S. Schneider, Goran Neshich und Carlos Chávez-Olórtegui
Mutalysin-II aus dem Schlangengift Lachesis muta muta ist eine Endopeptidase mit hämorrhagischer Aktivität. Zur Identifizierung eines Konformationsepitops verwendeten wir Blue Star Sting, die neueste Version der webbasierten Sting Millenium Suite, als alternatives computergestütztes Analysetool zur Auswahl und Entwicklung von Peptiden. Vorab ausgewählte Grenzwerte der Zugänglichkeits- und Hydrophilieparameter wurden verwendet, um Aminosäurereste als potenzielle Konformationsepitope auszuwählen. Ein Peptid (P117-Y116-C115-Q194-C195-L197-N198-K199-P200-Y5-L48) wurde manuell im Swiss-PDB-Viewer-Paket gezeichnet und mittels Fmoc-Synthese synthetisiert. Die Immunisierung von Kaninchen mit diesem Peptid induzierte Antikörper, die Mutalysin-II erkannten und vor den im Lachesis-Gift vorhandenen hämorrhagischen Faktoren schützten. Die Sting Millennium Suite konnte Konformationsepitope in dieser Proteinklasse vorhersagen. Drei Aminosäuren (K199, Y5 und L48) wurden als wesentlich für die Interaktion zwischen dem Peptid und den neutralisierenden Antikörpern identifiziert.