Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
Offener Zugang

Abstrakt

Isolierung von Plastochinon aus Spinat mittels HPLC

Marco Malferrari und Francesco Francia

Wir berichten über eine Methode zur Reinigung von Plastochinon-9 (PQ), einem Prenylchinon-Kofaktor, der an der photosynthetischen Elektronentransportkette beteiligt ist. Das beschriebene Verfahren basiert auf der Isolierung von Spinat-Chloroplasten, gefolgt von PQ-Extraktion und chromatographischer Fraktionierung. Die Extraktion von PQ wurde durch Aufteilung der Chloroplastensuspension mit Methanol:Petrolether erreicht. Dieses Verfahren entfernte große Mengen grüner Pigmente aus dem Extrakt und erleichtert so die anschließende chromatographische Isolierung von PQ. Um reines PQ zu erhalten, wurde die entwickelte Extraktion mit einem zweistufigen chromatographischen Ansatz unter Verwendung orthogonaler stationärer Phasen, d. h. Aluminiumoxid und Octadecylsilan (C18), kombiniert. Es wird ein Protokoll für analytische Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (RP-HPLC) im kleinen Maßstab beschrieben, das in den meisten Labors mit herkömmlichen Systemen durchgeführt werden kann. Die beschriebene Methodik stellt ein wertvolles Werkzeug für die schnelle Herstellung kleiner Mengen von PQ dar, für die keine kommerziellen Standards verfügbar sind.