Pharmazeutische Analytische Chemie: Offener Zugang
Offener Zugang

Abstrakt

Methodenentwicklung und Validierung einer stabilitätsanzeigenden RP-HPLC-Methode zur Bestimmung weiblicher Hormone in Hormonkonzentraten und Cremes

Pradeep Gautam

Es wurde eine schnelle, neuartige und effiziente, die Stabilität anzeigende Methode mit Umkehrphasen-Hochleistungsflüssigkeitschromatographie (RPHPLC) entwickelt und validiert, um vier weibliche Hormone zu bestimmen: Progesteron, Estron, Estradiol und Estriol in Hormonkonzentrat-Mischbasen. Die Trennung wurde mit einer RP-C18 Phenomenex® Gemini 150 × 4,6 mm C18 5µm-Säule unter Verwendung eines Phosphatpuffers (pH 6,4) und Acetonitril erreicht. Die entwickelte HPLC-Methode wurde mit den folgenden Methodenvalidierungskomponenten validiert: Linearität, Richtigkeit, Präzision, Zwischenpräzision und Robustheit. Mit dieser Methode wurden auch die Nachweisgrenze (LOD) und die Bestimmungsgrenze (LOQ) für alle vier Hormone ermittelt. Für die gleichzeitige Analyse aller vier Peaks wurde ein Photodiodenarray-Detektor (PDA) mit 225 nm Wellenlänge eingerichtet. Hormonkonzentratproben, Placebo und Hormonwirkstoffe wurden Stressbedingungen wie Hydrolyse (Säure und Base), oxidativem und thermischem Stressabbau ausgesetzt. Außerdem wurde die Stabilität der Standardlösung bestimmt. Diese HPLC-Methode für weibliche Hormone wurde gemäß den Richtlinien der International Conference on Harmonization (ICH) validiert. Die vorgeschlagene validierte Methode wurde erfolgreich für die quantitative Analyse von Masse, Stabilität und fertigen Hormonkonzentraten und Hormonmischungen verwendet.