Zeitschrift für Tumorforschung
Offener Zugang

Abstrakt

Modifizierte SEM-Präparation für THP-1-Monozyten

Heriberto DeLeon III, Anxui Kuang, Francisco Rugama und Thomas Eubanks

THP-1-Monozyten sind nicht anhaftende weiße Blutkörperchen, die typischerweise in makrophagenähnliche Zellen differenziert werden, um Zelladhäsion für Tests der Zelllebensfähigkeit zu induzieren. Die induzierte Differenzierung verändert jedoch auch die äußere Zellmorphologie von THP-1-Zellen, weshalb eine Protokolländerung und -entwicklung zu einer neuen Methode zur Präparation von THP-1-Monozyten für die Rasterelektronenmikroskopie geführt hat. Die Einbindung eines Polystyrolsubstrats, die Änderung des Dehydratationsgradienten und die Entfernung der kritischen Punkttrocknung haben sich als wirksam erwiesen, um THP-1-Monozyten für die Beobachtung vorzubereiten, ohne die äußere Struktur zu verändern. Die Analyse der Zellintegrität erfolgte anschließend durch Behandlung mit 100 nm rekombinantem Panton-Valentine-Leukozidin, um Zelllyse zu induzieren und die Beobachtung der inneren Zellzusammensetzung und der Qualität der Konservierung des vorgeschlagenen Vorbereitungsprotokolls zu ermöglichen.