Zeitschrift für Physikalische Chemie und Biophysik
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Abstrakt

Natürliches Aktin und Tropomyosin aus dem Fangmuskel von Weichtieren

Girich UV, Lazarev SS, Vyatchin IG, Matusovsky OS und Sheludko NS*

In dieser Arbeit wurden die Hauptproteine ​​dünner Filamente (Aktin und Tropomyosin) aus dem Fangmuskel der Muschel Crenomytilus grayanus und den Skelettmuskeln von Kaninchen isoliert. Kaninchen-Aktin und Tropomyosin sowie Muschel-Tropomyosin wurden im Gegensatz zu „natürlichem“ Muschel-Aktin mit herkömmlichen Methoden isoliert (eine Isolierung des Muschel-Aktins aus Acetonpulver ist unmöglich). Diese Proteine ​​wurden verwendet, um Aktin-Tropomyosin-Komplexe auf nicht-hybride und hybride Weise zu rekonstruieren. Ein nicht-hybrider Komplex, der aus Kaninchen-Aktin und Tropomyosin rekonstruiert wurde, weist eine höhere reduzierte Viskosität auf als ein Komplex aus Muschelproteinen, bei dem die reduzierte Viskosität von der intrinsischen Viskosität kaum zu unterscheiden war. Sowohl Kaninchen- als auch Muschel-Aktin wurden durch Polymerisations-Repolymerisationszyklen gereinigt, gefolgt von einer Gelfiltrationschromatographie. Während der Reinigung nahm die Viskosität beider Aktine zu und der Viskositätsunterschied zwischen ihnen nahm ab. Basierend auf der SDS-Elektrophorese haben wir außer Aktin keine anderen Proteine ​​in den chromatographischen Fraktionen gefunden. Die erhaltenen chromatographischen Fraktionen weisen jedoch erhebliche Unterschiede in Viskosität und Polymerisationsrate auf. Wir glauben, dass diese Eigenschaften durch das Vorhandensein eines „Endfaktors“ (wie β-Aktinin oder Cap Z) in Aktinpräparaten verursacht werden. Die erhaltenen Daten weisen darauf hin, dass die Isolierung von „natürlichem“ Aktin von einer Koextraktion eines unbekannten oder bekannten „Endfaktors“ in Mengen begleitet wird, die größer sein können als die aus dem Acetonpulver der Skelettmuskulatur von Kaninchen gewonnenen.