Zeitschrift für Zellwissenschaft und Therapie
Offener Zugang
ISSN: 2157-7013
ISSN: 2157-7013
Ida Rachel Rajiah
Poly(ADP-Ribose)-Polymerase-1 (PARP-1) ist ein nukleäres Enzym, das eine wichtige Rolle bei der DNA-Reparatur spielt. Dies macht es zu einem attraktiven therapeutischen Ziel in der Krebstherapie. Es wird durch DNA-Brüche aktiviert und katalysiert die Synthese von Homopolymeren von ADP-Ribose aus NAD+. Kompetitive Inhibitoren sowie die nichtkatalytische DNA-bindende Domäne von PARP-1 heben seine Polymersynthesefunktion auf. Solche Inhibitoren von PARP-1 wurden in klinischen Studien verwendet und sind dafür bekannt, Übelkeit, Müdigkeit und hämatologische Ereignisse zu verursachen und bei chronischer Anwendung das Risiko von medikamenteninduzierten DNA-Schäden und Tumorbildung zu erhöhen. In dieser Studie habe ich die Wirkung des N-terminalen Fragments von PARP-1 auf die endogene PARP-1-Aktivität und -Expression in Säugetierzellen untersucht. Um eine DNA-Schadensreaktion hervorzurufen, wurden unterschiedliche Konzentrationen von H2O2 verwendet. Zur Visualisierung der Wirkungen durch Live-Bildgebung wurde das 750 bp lange N-terminale Fragment von PARP-1 an den EGFPN1-Vektor markiert. Meine Daten zeigen eine inverse Korrelation zwischen der Expression dieses Fragments und der Poly(ADP-Ribose)-Synthese bei niedrigeren H2O2-Konzentrationen und der Induktion der Apoptose bei höheren Konzentrationen. Meine experimentellen Beweise unterstützen auch die Regulierung der endogenen PARP-1-Expression durch das Fragment in Abwesenheit von DNA-Schäden. Dieses Konstrukt hat die Visualisierung seiner funktionellen Fähigkeit ermöglicht, Zellen für oxidative Schäden zu sensibilisieren und Apoptose zu induzieren, wie durch die Bildung von apoptotischen Vorläufern und Caspase-Spaltprodukten in lebenden Zellen beobachtet wurde. Die Daten liefern auch direkte Beweise für sein therapeutisches Potenzial in der Chemotherapie oder Strahlentherapie, um eine durch Nekrose induzierte Entzündungsreaktion abzuwenden.