Zeitschrift für Chromatographie und Trenntechniken
Offener Zugang

Abstrakt

Herstellung universeller Peroxidase-markierter bakterieller Proteinkonjugate und Trenneigenschaften

Angel Alberto Justiz-Vaillant

Das Ziel dieser Studie war, chimäre bakterielle Proteinkonjugate herzustellen, sie durch Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) zu trennen und ihre Reaktivität mit Humanserum-Immunglobulinen durch Immunoblot-Analyse zu untersuchen. Universelle Konjugate: Protein-LA-Peroxidase (SpLA-HRP), Protein-LG-Peroxidase (SpLG-HRP), Protein-AG-Peroxidase (SpAG-HRP), Protein-LAG-Peroxidase (SpLAG-HRP) und andere wurden mit der Periodatmethode hergestellt. Die Konjugate waren polymer und hatten ein hohes Molekulargewicht (MW) im Bereich von 80-90 kDa bis über 220 kDa. Alle Konjugate wiesen eine ähnliche Anzahl von Proteinbanden auf. Allerdings waren SpLALG-HRP und SpLAG-Anti-IgY-HRP weniger polymer. Immunoblot-Analysen zeigten, dass alle Konjugate mit Humanserum-Igs reagierten. Diese Konjugate können möglicherweise bei epidemiologischen Untersuchungen zoonotischer Infektionen bei Vogel- und Säugetierarten eingesetzt werden. Mit der Periodatmethode konnten chimäre Konjugate aus Peroxidase-markierten Immunglobulin-bindenden Proteinen hergestellt werden. Die Immunoblot-Analyse ergab, dass sie funktionell und wirksam mit Immunglobulinen aus menschlichem Serum reagierten.