ISSN: 2471-9315
Doughari JH und Onyebarachi GC
Polygalacturonase ist ein pektinolytisches Enzym, das die hydrolytische Spaltung der polygalacturonischen Rückgratkette katalysiert. In dieser Studie wurde Polygalacturonase aus Aspergillus flavus produziert , der von einer Orangenabfalldeponie isoliert wurde. Die Produktion erfolgte durch Feststofffermentation. Die optimale Produktion von Polygalacturonase wurde bei einer Inkubationszeit von 96 h, einem pH-Wert von 4,5 und 35°C unter Verwendung von Ammoniumsulfat und Orangenschale als beste Stickstoff- bzw. Kohlenstoffquellen erreicht. Das Enzym wurde mit 60% Ethanol gefällt, was zu einer 3,54-fachen Reinheit führte, und die Reinheit des Enzyms mit Sephadex G-75 führte zu einer 9,93-fachen Reinheit. Das gereinigte Enzym zeigte in Gegenwart von Polygalacturonsäure bei 35°C und einem pH-Wert von 4,5 maximale Aktivität, während bei der Analyse durch Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamid-Gelelektrophorese (SDS-PAGE) ein Molekulargewicht von 66 kDa ermittelt wurde. Die K m- und V max- Werte des Enzyms lagen bei 0,705 mg/ml bzw. 1,0508 μmoL/min. Die Zugabe von Metallchloriden und Inhibitoren reduzierte die Enzymaktivität. Aufgrund der physikochemischen Eigenschaften des gereinigten Enzyms besitzt dieses Enzym großes Potenzial für industrielle und biotechnologische Anwendungen wie Obstklärung und Ölextraktion.