Zeitschrift für antivirale und antiretrovirale Medikamente
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Abstrakt

Rekombinantes Coree1e2-Protein, exprimiert in Hefe Pichia pastoris, ein Impfstoffkandidat gegen das Hepatitis C-Virus

Mehdi Fazlalipour, Hossein Keyvani, Seyed Hamid Reza Monavari und

Hintergrund: Die Infektion mit dem Hepatitis-C-Virus (HCV) ist sowohl in Industrie- als auch in Entwicklungsländern ein großes Gesundheitsproblem. HCV ist eine globale durch Blut übertragene Krankheit, die fast 3 % der Weltbevölkerung mit einer Morbiditäts- und Mortalitätsrate betrifft. Die Wirksamkeit der Hepatitis-C-Behandlung ist nicht zufriedenstellend und die Entwicklung eines wirksamen Impfstoffs kann für die Bekämpfung der HCV-Infektion von entscheidender Bedeutung sein. Die Proteine ​​E1 und E2, zwei stark glykosylierte Hüllproteine, die neutralisierende Antikörper gegen die HCV-Infektion im Wirt hervorrufen können, sowie Core-, E1- und E2-Proteine ​​sind die wichtigsten Impfstoffkandidaten für die Impfung. ELISA ist einer der Routinetests, der in klinischen Labors und verschiedenen Studien verwendet wurde, um die Antikörperrate in Seren gegen eine HCV-Infektion festzustellen. Ziel: Die Entwicklung und schrittweise Entwicklung eines nützlichen Impfstoffs kann der wichtigste Punkt bei der Bekämpfung und Ausrottung der Infektion mit dem Hepatitis-C-Virus (HCV) sein. Jüngste Studien haben gezeigt, dass HCV-Hüllglykoproteine ​​neutralisierende Antikörper gegen die Antigendomäne von HCV induzieren können. Daher gelten HCV-Hüllproteine ​​als wichtigste HCV-Impfstoffkandidaten. Methoden: In dieser Studie verwendeten wir das Hefe-Expressionssystem von Pichia pastoris zur Expression des rekombinanten HCV-CoreE1E2-Proteins, das aus Core (269 nt-841nt), E1 (842 nt-1417nt) und E2 (1418 nt-2506nt) besteht. Pichia pastoris kann hohe Mengen des rekombinanten HCV-CoreE1E2-Proteins produzieren. Das Protein ist glykosyliert und durch Codon-Optimierung auf Basis des Pichia-Expressionssystems konnten wir den Anteil rekombinanter Proteine ​​erhöhen. Außerdem kann das gereinigte Protein effizient Anti-CoreE1E2-Antikörper in Kaninchen induzieren und durch die Entwicklung eines selbstgemachten ELISA-Kits können wir Antikörper von iranischen HCV-Patienten mit Genotyp 1a nachweisen. Ergebnisse: Obwohl wenig über den Mechanismus der Hepatitis C-Virionenassemblierung bekannt ist, wurden in unserer Studie virusähnliche Partikel von rCoreE1E2 mit einer Größe von 70 nm durch Elektronenmikroskopie nachgewiesen und die Selbstassemblierung in vitro im Hefeexpressionssystem nachgewiesen. Schlussfolgerung: Diese Erkenntnisse zeigen, dass das rekombinante CoreE1E2-Glykoprotein neutralisierende Antikörper wirksam induziert und ein einflussreicher HCV-Impfstoffkandidat ist.