ISSN: 2153-0637
Kathrin M. Engel, Jenny Schroeter, Yulia Popkova und Jürgen Schiller
Phospholipide sind wesentliche Bestandteile von Zellmembranen und Organellen. Darüber hinaus sind sie in Körperflüssigkeiten vorhanden, insbesondere im Blut, wo Lipide in Form von Lipoproteinen „wasserlöslich“ gemacht werden, um ihren Transport in einer wässrigen Umgebung zu ermöglichen [1]. Das allgegenwärtige Vorkommen von Lipiden führte zur Entwicklung verschiedener analytischer „Lipidomics“-Techniken, wobei die Mehrzahl dieser Methoden auf Massenspektrometrie (MS) basiert [2]. Obwohl auf diesem Gebiet enorme Fortschritte erzielt wurden, gilt die Lipidanalyse aufgrund der extremen strukturellen Variabilität von Lipiden, die zum Auftreten von Hunderten verschiedener Lipidspezies in einer typischen biologischen Probe führt, immer noch als herausfordernd [3]. Dies liegt an (a) den verschiedenen Kopfgruppen wie Phosphorylcholin oder -ethanolamin, (b) den unterschiedlichen Fettacylresten, die von gesättigten Resten wie Myristinsäure (14:0) bis zu stark ungesättigten Resten wie Docosahexaensäure (22:6) reichen, und (c) den Verknüpfungstypen (Acyl-Acyl-, Alkyl-Acyl- und Alkenyl-Acyl) [4]. All diese strukturellen Aspekte können nicht in einem einzigen MS-Experiment allein anhand der m/z-Verhältnisse beurteilt werden. Entweder ist eine LC-Trennung vor der MS, ausgefeilte MS/MS-Techniken und/oder zusätzliche Methoden wie die Ionenmobilitätsspektroskopie erforderlich [5]. Es muss auch betont werden, dass quantitative Daten nur (wenn überhaupt) erhalten werden können, wenn geeignete Lipidstandards verwendet werden: normalerweise wird ein stabil isotopenmarkierter (deuterierter oder 13C-markierter) Standard pro Lipidklasse benötigt [6]. Diese Standards sind auch nützlich, um Verluste bestimmter Lipidklassen während des Extraktionsprozesses zu korrigieren, der zur Anreicherung von Lipiden sowie zur Entfernung von Salzen und anderen Verunreinigungen erforderlich ist. Obwohl solche isotopenmarkierten Standards recht teuer sind, sind sie heutzutage von vielen Unternehmen kommerziell erhältlich. Leider ist die Situation viel schwieriger, wenn oxidierte Lipide von Interesse sind.