ISSN: 2329-6674
Smarajit Maiti, Sudipta Roy und Sumit Sahoo
Salztolerante alkalische Amylase produzierende Bacillus sp. MRS6 wurde aus drei städtischen Mülldeponien der Stadt Medinipur im Distrikt Paschim Medinipur im Süden von Westbengalen, Indien, isoliert. Der Stamm wurde mithilfe eines mehrphasigen Ansatzes charakterisiert. Die Produktion extrazellulärer Enzyme erfolgte in Mineralsalzmedien bei pH-7, 35°C mit 2 % löslicher Stärke als einziger Kohlenstoffquelle. Es zeigte sich, dass die vom salztoleranten Stamm produzierte Amylase in einem alkalischen pH-Bereich (6–9) eine hohe Aktivität aufwies, wobei pH-8 das Optimum darstellte. Eine Inkubationszeit von 30 Minuten bei 35°C erwies sich als optimale Temperaturbedingung für seine Aktivität. Dieses alkaliphile, salztolerante Enzym blieb bis zu 80°C, 4 M NaCl stabil. Mn2+, Ca2+ spielen eine entscheidende Rolle bei der >80%igen Steigerung dieser Enzymaktivität. EDTA, β-Merkeptoethanol und Detergenzien hemmen die Enzymaktivität stark. Dieses Enzym konnte feste Substrate, d. h. Weizenkleie, besser fermentieren als Reishülsen. Dieses Enzym wurde teilweise durch kalte Acetonfällung gereinigt und die Molekülmasse wurde durch SDS-PAGE mit 55 kDa bestimmt. Die vorliegenden Ergebnisse lassen darauf schließen, dass es sich bei dem Enzym um halophile alkalische Amylase handelt. Das vorliegende Enzym ist in der modernen Biotechnologie von großer Bedeutung und findet Anwendung in der Lebensmittel-, Fermentations-, Textil-, Waschmittel- und Papierindustrie.