Enzymtechnik
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Abstrakt

Niedermolekulare Proteintyrosinphosphatasen kontrollieren die Antibiotikaproduktion in Streptomyces coelicolor A3(2)

Sujata Vijay Sohoni, Sarah Lieder, Prashant Bapat, Ivan Mijakovic und Anna Eliasson Lantz

Streptomyces coelicolor A3(2) besitzt eine niedermolekulare Protein-Tyrosinphosphatase (LMW-PTP), PtpA, die die Produktion von Undecylprodigionsin (RED) und Actinorhodin (ACT) beeinflusst. In dieser Studie haben wir eine weitere LMW-PTP namens sco3700 identifiziert. Die Tyrosinphosphataseaktivität des gereinigten Sco3700 wurde unter Verwendung von Para-Nitrophenylphosphat und dem Tyrosin-phosphorylierten Protein PtkA aus Bacillus subtilis als Substrate ermittelt. Der optimale pH-Wert für die Sco3700-Phosphataseaktivität betrug 6,8, und KM für pNPP betrug 14,3 mM im Vergleich zu pH 6,0 und KM0,75 mM für PtpA. Das Potenzial von Sco3700, neben PtpA an der Regulierung der Antibiotikaproduktion von S. coelicolor teilzunehmen, wurde untersucht. Daher wurden S. coelicolor A3(2)-Stämme mit ptpA- und sco3700-Überexpression konstruiert und hinsichtlich Wachstum, RED- und ACT-Produktion charakterisiert. Wir konnten einen Anstieg der volumetrischen Produktivität von ACT im ptpA-überexpressiven Stamm beobachten. Darüber hinaus wurde ein deutlich früherer Beginn der ACT-Produktion beobachtet, wenn ptpA überexprimiert war. Die Überexpression von Sco3700 hatte eine pleiotrope Wirkung auf die Zelle, und der Stamm wies geringere Produktivitäten und Endkonzentrationen von Antibiotika auf. Wir schlussfolgern, dass Sco3700 tatsächlich eine Tyrosinphosphatase ist und zur Regulierung der Antibiotikaproduktion in S. coelicolor beiträgt, indem es den Zeitpunkt des Beginns der Antibiotikaproduktion beeinflusst.