Enzymtechnik
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Abstrakt

Supermolekül mit niedriger relativer Molekülmasse Aminoalkansäure Management von Phosphatasen Antibiotika-Produktion in Actinomycete coelicolor A3(2)

Sohoni SV

Streptomyces coelicolor A3(2) besitzt eine Protein-Tyrosinphosphatase mit niedrigem Molekülgewicht (LMW-PTP), PtpA, die die Produktion von Undecylprodigionsin (RED) und Actinorhodin (ACT) beeinflusst. In dieser Studie identifizierten wir eine neue LMW-PTP namens sco3700. Die Tyrosinphosphatase-Bewegung des gereinigten Sco3700 wurde unter Verwendung von Para-Nitrophenylphosphat und dem Tyrosin-phosphorylierten Protein PtkA von Bacillus subtilis als Substrate aufgebaut. Der ideale pH-Wert für die Sco3700-Phosphatase-Bewegung betrug 6,8, und KM für pNPP betrug 14,3 mM im Vergleich zu pH 6,0 und KM0,75 mM für PtpA. Die Fähigkeit von Sco3700, neben PtpA an der Regulierung der antiviralen Produktion von S. coelicolor teilzunehmen, wurde untersucht. Daher wurden S. coelicolor A3(2)-Stämme mit ptpA- und sco3700-Überexpression entwickelt und auf Wachstum, RED- und ACT-Produktion getestet. Wir stellten eine Erhöhung der volumetrischen Produktivität von ACT im ptpA-Stamm gegenüber dem Expressionsstamm fest. Außerdem wurde ein deutlich früherer Beginn der ACT-Produktion beobachtet, wenn ptpA überexprimiert wurde. Die Überexpression von Sco3700 hatte eine pleiotrope Wirkung auf die Zelle, und der Stamm zeigte geringere Produktivitäten und Endgruppen von Antibiotika. Wir folgern, dass Sco3700 definitiv eine Tyrosinphosphatase ist und zur Regulierung der Antibiotikaproduktion in S. coelicolor beiträgt, indem es den Zeitpunkt des Beginns der Antibiotikaproduktion beeinflusst.