Zeitschrift für Gartenbau
Offener Zugang

Abstrakt

Optimierung der zweidimensionalen Gelelektrophorese-Analyse von Chinakohlknospen (Brassica rapa L. Ssp. Pekinensis)

Xue Zhou, Ruiqin Ji, Zhiyong Liu und Hui Feng

Um ein geeignetes und wirksames Protokoll für die zweidimensionale Gelelektrophorese (2-DE)-Analyse der Knospen von Brassica rapa L. ssp. Pekinensis zu etablieren , wurden Gesamtproteine ​​aus fruchtbaren Knospen der A/B-Linie AB01 mithilfe von drei verschiedenen Methoden extrahiert (Tris-Aceton-Phenol-Methode, Trizol-Fällungsmethode, TCA-Aceton-Fällungsmethode). Darüber hinaus wurden vier Aspekte des 2-DE-Systems optimiert, darunter das IEF-Protokoll, die SDS-PAGE-Gelkonzentration, der pH-Bereich der IPG-Streifen und das Proteinprobenvolumen. Die Ergebnisse zeigen, dass die TCA-Aceton-Fällungsmethode die wirksamste Methode zur Extraktion Gesamtproteins ist und dass ein optimiertes 2-DE-System mit dem 20.000 Vh IEF-Protokoll, IPG-Streifen mit pH 4-7, 12 % SDS-PAGE-Gelkonzentration und Proteinprobenvolumina von 250 μg für die 2-DE-Analyse von Proteinen fruchtbarer Knospen in Chinakohl geeignet ist. Diese Ergebnisse können zur Durchführung proteomischer Untersuchungen der genetischen männlichen Sterilität bei Brassica rapa L. ssp. Pekinensis verwendet werden .