Enzymtechnik
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Abstrakt

Papain-katalysierte Oligomerisierung in einphasigen wässrigen organischen Medien - Synthese und Charakterisierung neutraler und polarer Aminosäure-Oligomere

Srinivasan SK, Kapila S, Daniel F und Nam 

Die Synthese von Oligopeptiden wird im Allgemeinen in wässrigen oder zweiphasigen Reaktionsmedien durchgeführt; die Verwendung einphasiger Reaktionsmedien ist recht begrenzt. In dieser Studie wurden Homo-Oligopeptide von Lysin (Lys), Glycin (Gly), Methionin (Met) und Tyrosin (Tyr) durch eine Papain-katalysierte Reaktion in einphasigen Systemen aus Acetonitril/Wasser synthetisiert. Die Reaktionsbedingungen wurden für die Bildung von Peptidbindungen und zur Minimierung der Enzymdenaturierung optimiert. Solche Medien sind besonders attraktiv, da sie die sekundäre und umgekehrte Hydrolyse des Acylkomplexes bzw. des Oligopeptids minimieren können. Die synthetisierten Oligopeptide wurden gereinigt und durch Umkehrphasenflüssigchromatographie (RPLC) und Elektrospray-Ionisations-Massenspektrometrie (ESI-MS) charakterisiert. Die Ausbeute an Oligopeptiden betrug für alle Aminosäuren ungefähr 80 %. Die Stereospezifität von Papain in Acetonitril/Wasser-Medien wurde ebenfalls untersucht. Die getrennten Enantiomere von Methionin wurden mittels chiraler Hochdruckflüssigkeitschromatographie (HPLC) charakterisiert. Die Ergebnisse zeigen, dass die L-Spezifität von Papain in monophasischen Medien erhalten bleibt.